甘蓝下胚轴的高效再生和农杆菌介导B.T.基因转化甘蓝

• 来源期刊: 上海农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 甘蓝 下胚轴 再生 农杆菌介导 基因转化 B.T.基因 转基因植株
• 年，卷（期）: 1998,（2）
• 页码范围: 11-18
• 页数: 8页
• 分类号: Q943
• 语种: 中文

摘要

分别对取材时间和培养基组成进行研究,建立了甘蓝下胚轴外植体的高效再生系统,当选取6~7d苗龄的下胚轴,将其置于MSB+BA2.5mg/L+ZT1mg/L+IBA0.1mg/L的芽分化培养基中,并于培养基中附加AgNO37.5mg/L时,最高的芽分化频率,"夏光甘蓝"母本"103"可达81.67％,父本"60天早椰菜"可达78.56％.在此基础上,我们对影响转化频率的不同因素,即:抑制农杆菌生长的抗生素种类及其浓度、预培养的有无及感染时的浓度、下胚轴外植体与农杆菌的感染时间和共培养时间、筛选时抗生素的加入时间进行了探讨.共获得100余株卡那霉素抗性植株,全部移栽成活,生长良好.对转基因植株总DNA进行Southernblotting分析,证明nptⅡ基因已整合到甘蓝植株细胞基因组中.