定量测定甲胺磷残留的间接竞争ELISA的建立和初步应用

• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 甲胺磷 酶联免疫吸附测定 残留分析 最低检测量 气相色谱分析
• 年，卷（期）: 1998,（2）
• 页码范围: 40-46
• 页数: 7页
• 分类号: S481.8
• 语种: 中文

摘要

以水溶性碳化二亚胺法将甲胺磷(MTP)分子偶联到牛血清白蛋白(BSA)上,用此合成的免疫原复合物制备了特异性的兔抗甲胺磷多抗血清.抗血清的ELISA效价为1∶12800~1∶51200;抗血清与乙酰甲胺磷的交叉反应率为10.5％,与供试的其它9种有机磷农药的交叉反应率均小于2.8％.用同样的方法合成了甲胺磷－卵清蛋白复合物作为包被抗原,建立了适于环境中甲胺磷残留分析的间接竞争ELISA工作程序,在明确了该方法的工作条件及其基本参数的基础上,用建立的ELISA方法测定了稻谷和小白菜叶片样品中的甲胺磷残留量,并与GC方法的测定结果进行了比较.结果表明:建立的ELISA方法对甲胺磷纯品的最低检测量为0.85NG/ASSAY,线性检测范围为0.032~500μG/ML;在该范围内,标准曲线的批内和批间变异系数分别为3.79％和4.43％;稻谷和小白菜叶片样品中添加甲胺磷后的平均回收率分别90.3％和93.2％;在测定的31份稻谷和45份小白菜样品中,ELISA检测为阳性的样品百分率分别为16.1％和46?7％,阳性样品中甲胺磷的残留量为0.024~74.962MG/KG;ELISA测定结果与GC测定结果呈显著的线性