猪繁殖与呼吸综合症病毒分离毒株基因型的鉴定

• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合症病毒 基因型 ORF 7 RT-PCR RFLP
• 年，卷（期）: 1998,（4）
• 页码范围: 23-27
• 页数: 5页
• 分类号: S855.3
• 语种: 中文

摘要

根据猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)美洲型参考毒株ATCCVR－2332株ORF7及部分3＇端非编码区(UTR)基因序列,设计合成了一对美洲型毒株特异性引物,采用反转录－聚合酶链式反应(RT－PCR)技术成功地从6株PRRSV国内分离株BJ1~6株中扩增出与预期大小相同的基因片段,大小约571BP,与美洲型参考毒株ATCCVR－2332株扩增产物大小相似.扩增产物经限制性内切酶PVUⅡ酶切作RFLP分析证实RT－PCR产物确为PRRSV美洲型ORF7及部分3＇UTR.以该引物对PRRSV欧洲型LV株及未感染PRRSV的HS.2H细胞进行同样的RT－PCR扩增没有检测到任何扩增条带.RT－PCR和RFLP分析结果表明,这6株分离毒株基因型属于美洲型,与单克隆抗体间接免疫荧光试验结果一致.此外,还对RT－PCR检测PRRSVRNA的样品处理方法作了初步研究,结果表明该方法可用于直接从PRRSV感染的细胞单层和培养物上清中检测PRRSVRNA,从而为RT－PCR应用于PRRSV临床诊断奠定了基础.