人δ珠蛋白基因启动子区-64位C→T点突变对DNA结合蛋白的影响

• 来源期刊: 科学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: δ珠蛋白基因 启动子 结合蛋白 凝胶迁移率改变实验
• 年，卷（期）: 1998,（6）
• 页码范围: 601-607
• 页数: 7页
• 分类号: Q753
• 语种: 中文

摘要

用凝胶迁移率改变实验 (EMSA)研究了人δ珠蛋白基因启动子区 - 6 4C→T点突变对DNA结合蛋白的影响 .人工合成两条 36bp该基因启动子区 - 83~ - 4 8bp之间的片段WOG和MOG ,WOG含有野生型"CAAT样盒"(CCAAC) ,MOG含有变异型"CAAT样盒"(CCAAT ,- 6 4C→T) .结果表明 :(1)在红系细胞MEL ,k56 2以及经Hemin诱导的k56 2细胞中 ,MOG对CCAAT结合蛋白 (CFB)和GATA 1的亲和力显著增加 ;(2 )经Hemin诱导的k56 2细胞中除上述两种因子外 ,还存在两种新的特异DNA结合蛋白C和D ,前者与WOG和MOG结合 ,可能与k56 2细胞受诱导后基因表达提高有关 ;后者只与MOG结合 ,可能与 - 6 4C→T的点突变有关 ;(3)人胚胎发育不同阶段胎肝细胞核抽提物EMSA结果提示人胚胎发育不同阶段δ基因表达被抑制的机制可能不同 .结果证明δ基因启动子缺陷的CAAT样盒是引起δ基因低水平表达的重要因素 ,缺陷的顺式作用元件CAAT样盒通过影响反式因子CBF及GATA 1的结合影响基因的表达