小鼠胚胎干细胞凝血因子IX基因的定向敲除

• 作者: 傅继梁 戴旭明 杨桦 胡以平 薛红
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 胚胎干细胞 基因打靶 基因敲除 凝血因子Ⅸ 血友病B
• 年，卷（期）: 1998,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2313字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0258-879X.1998.01.001

摘要

目的:将小鼠胚胎干细胞中凝血因子Ⅸ(mFⅨ)基因定向敲除,为建立血友病B的转基因小鼠模型奠定基础;摸索建立ES细胞基因打靶技术体系.方法:将线性化的针对小鼠mFⅨ基因组的基因打靶置换型载体(pMFⅨDEL)DNA用电穿孔法转入小鼠ES细胞,经过G418和GANC分组药物选择,用PCR和基因组Southern杂交两种方法,鉴定药物抗性细胞中发生同源重组的情况.结果:(1)从药物抗性细胞克隆中鉴定获得了4个发生了按所设计的方式进行了同源重组的ES细胞克隆;(2)观察到在Es细胞中,pMFⅨDEL载体DNA与内源mFⅨ基因发生同源重组的频率平均为1.67×10-6.结论:得到了4个mFⅨ基因已被敲除的ES细胞克隆;建立了ES细胞基因打靶的技术体系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	傅继梁	第二军医大学基础医学部医学分子遗传学开放实验室	53	227	8.0	12.0
2	薛红	香港科技大学生物化学系	15	79	5.0	8.0
3	胡以平	第二军医大学基础医学部医学分子遗传学开放实验室	102	550	11.0	19.0
4	戴旭明	第二军医大学基础医学部医学分子遗传学开放实验室	5	33	4.0	5.0
5	杨桦	第二军医大学基础医学部医学分子遗传学开放实验室	7	32	4.0	5.0