新型杆状病毒穿梭载体及绿色荧光蛋白在棉铃虫中的表达

• 来源期刊: 科学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 棉铃虫核多角体病毒 转座-穿梭载体 重组杆状病毒 绿色荧光蛋白基因
• 年，卷（期）: 1998,（20）
• 页码范围: 2178-2183
• 页数: 6页
• 分类号: Q943
• 语种: 中文

摘要

利用棉铃虫核型多角体病毒的全基因组DNA构建转座_穿梭载体Hanpvid ,它既能在大肠杆菌中以质粒的形式复制 ,又能在棉铃虫细胞中复制形成感染性病毒粒子 .Hanpvid携带转座_穿梭盒 ,包括原核复制子miniF ,卡那霉素抗性基因Kan ,LacZα和Tn7转座子的接受位点attTn7.另一供体质粒以转座的方式将绿色荧光蛋白基因 ( gfp)和经亚克隆的多角体蛋白基因 (ocu)整合到Hanpvid的attTn7位点上成为重组病毒rHa_FaGP .Southernblotting证实重组病毒的构建是正确的 ,SDS_PAGE证明 gfp和ocu在棉铃虫细胞中高效表达 .以重组病毒感染 3龄幼虫 ,4d后 ,能看到大量发绿色荧光的血淋巴细胞 ,6d后 ,在自然光下即可见发绿色荧光的棉铃虫幼虫 .