检测中国对虾非包涵体型杆状病毒的PCR方法的建立

• 作者: 侯云德 徐洪涛 朱俊萍 朴春爱 王长安 王雷 相建海 董杰 金奇
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: 中国对虾 白斑征杆状病毒(WSBV) 中国对虾非包涵体型杆状病毒(PcNOBV) 聚合酶链式反应 诊断
• 年，卷（期）: 1999,（4）
• 所属期刊栏目: 病毒学诊断
• 页码范围: 354-359
• 分类号: S945.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.1999.04.009

摘要

中国对虾非包涵体型杆状病毒(PcNOBV)是中国大陆养殖的中国对虾(Penaeus chinensis)暴发性流行病--白斑综合征的主要病原,与台湾流行的PmNOBⅢ、泰国的PmNOBⅡ及日本的RV-PJ(＝PRDV)有相似的致病特征、形态学及组织病理学特征.为了解PcNOBV与PmNOBⅢ两种地域分布邻近的毒株基因水平的关系,并建立早期、敏感、特异的检测技术,利用氯化铯密度梯度超速离心技术分离纯化了PcNOBV核衣壳,根据台湾地区分离的PmNOBⅢ的基因序列设计一对引物,从纯化的PcNOBV DNA及自然发病的中国对虾、日本对虾和斑节对虾组织DNA中成功地扩增出长为355bp的目的片段,可检测出3.4pg的PcNOBV DNA.从健康对虾组织提取的DNA未能扩增出目的片段.扩增片段序列与PmNOBⅢ相应的基因序列相同.该结果从分子水平证实PcNOBV与PmNOBⅢ存在基因同源性,同时表明聚合酶链式反应(PCR)可以作为检测PcNOBV的一种敏感、特异、早期、快速的诊断手段.