人真皮微血管内皮细胞的体外分离和原代培养

• 作者: 姜笃银 徐明达 朱雄翔 汤朝武 胡大海 苏映军 贾赤宇 陈璧 韩军涛
• 来源期刊: 西北国防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人真皮 微血管 内皮细胞 原代培养
• 年，卷（期）: 1999,（4）
• 所属期刊栏目: 研究原著
• 页码范围: 244-248
• 分类号: R644
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-8622.1999.04.003

摘要

目的:建立体外分离及培养人真皮微血管内皮细胞的方法,为进一步开展创面愈合及相关领域的细胞和分子生物学研究提供物质基础和实验模型.方法:健康成人中厚皮组织经中性蛋白酶消化后去除表皮;然后,采取薄片真皮组织胰蛋白酶低湿慢速灌注法消化微血管内皮细胞;将获取的微血管内皮细胞于不同条件的培养基内连续培养5～15 d,观察其基本生物学生长特征,并采用免疫细胞化学方法行Ⅷ因子相关抗原染色鉴定.结果:①采用中性蛋白酶及胰蛋白酶分步消化法,所分离获得的细胞体外具有很强的增殖能力;该细胞呈现Ⅷ因子相关抗原阳性,说明为真皮微血管内皮细胞;②细胞单层培养时显示活跃的形成类管腔状结构的生物学特征;③真皮微血管内皮细胞在不同培养基内生长状态不同,含8%胎牛血清、2%人分娩前母体血清及适量cAMP等添加物的IMDM为其较理想的培养基.结论:经体外分离及培养获得了生长性良好的人真皮微血管内皮细胞.