P53融合蛋白的原核表达及其单克隆抗体的制备

• 作者: 刘彩云 孙素莲 寿成超 张蕾 曾荔
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 医学
• 关键词: P53融合蛋白 单克隆抗体 免疫组织化学
• 年，卷（期）: 1999,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 61-64
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2988字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3321/j.issn:0529-1356.1999.01.016

摘要

目的为研制出能特异与P53结合的单克隆抗体,使对P53的检测得到更为广泛的应用. 方法用PCR技术扩增编码人P53N-端180个氨基酸的DNA片段并将其克隆在谷胱苷肽转移酶(GST)表达质粒PGEX-2T中.用该重组质粒转化大肠杆菌JM109,并经异丙基β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导产生P53-GST融合蛋白.用P53-GST免疫BALB/c小鼠.常规细胞融合,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)双筛和免疫组织化学(IHC)筛选. 结果获得一株能稳定分泌抗P53单抗的杂交瘤细胞株,其分泌的单抗(命名为M126),亚类为IgG2b.用单抗M126与常用P53进口单抗PAB1801(ZYMED公司)同时对52例乳腺癌的石蜡切片标本进行IHC分析,阳性检测率分别为48.1%(25/52)和42.3(22/52),与PAB1801相比M126表现出更强的反应特异性,在一定程度上优于PAB1801. 结论 M126可替代进口单抗PAB1801用于P53免疫组织化学研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	寿成超	北京医科大学肿瘤临床学院北京肿瘤防治研究所	8	40	4.0	6.0
2	刘彩云	北京医科大学肿瘤临床学院北京肿瘤防治研究所	3	4	1.0	2.0
3	孙素莲	北京医科大学肿瘤临床学院北京肿瘤防治研究所	4	37	2.0	4.0
4	张蕾	北京医科大学肿瘤临床学院北京肿瘤防治研究所	4	3	1.0	1.0
5	曾荔	北京医科大学第一医院泌尿外科研究所	2	8	2.0	2.0