表达重组鸡新城疫病毒免疫原蛋白基因的研究

• 来源期刊: 上海农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡新城疫病毒 重组禽痘病毒 噬斑筛选 SOUTHERN杂交
• 年，卷（期）: 1999,（3）
• 页码范围: 58-61
• 页数: 4页
• 分类号: Q786|S852.65
• 语种: 中文

摘要

以 N D V H N 基因重组禽痘病毒载体与禽痘病毒转染液为材料,以载体质粒的 LAC Z报告基因为筛选标记,在含有 X?GAL的培养基上筛选蓝色空斑的阳性重组子,对初次筛选到的蓝色空斑经过三轮蚀斑纯化(蓝斑形成率达90％ 以上),得到了能稳定增殖的病毒子;再分别提取病毒子感染细胞、正常对照细胞基因组 D N A, BAM HⅠ酶切后,以 D I G 标记的探针进行 SOUTHERN 杂交检测,发现重组病毒感染的细胞基因组 D N A 在7 KB 处有一 D N A 片段,能与 H N 特异性探针呈阳性反应,而对照细胞没有,从而利用 LAC Z报告基因、 H N 探针杂交检测,我们成功地筛选并获得了 N D V H N 基因重组禽痘病毒,为下一步的研究工作奠定了基础.