家猪随机扩增多态DNA最佳反应体系的探讨

• 来源期刊: 江西农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪 RAPD 反应体系
• 年，卷（期）: 1999,（2）
• 页码范围: 129-133
• 页数: 5页
• 分类号: S828.2
• 语种: 中文

摘要

在研究江西地方猪种的遗传多样性及其系统分类时,对模板浓度和纯度、引物种类和浓度、DNTP浓度、镁离子浓度、温度转换时间以及双引物扩增等影响RAPD分析的因素进行了系统的探讨,在此基础上建立了适宜于本实验室研究的最佳RAPD技术体系:20μL反应体系中,含10MMOL/LTRIS－HCL,PH8.3,50MMOL/LKCL,2.5MMOL/LMGCL2,0.2MMOL/LDNTP,0.45μMOL/L随机引物,1.5UNITTAQ聚合酶,20NG模板,0.5MG/MLBSA.热循环参数为:94℃预变性4MIN,然后94℃变性1MIN,36℃退火1MIN,72℃延伸2MIN40个循环,最后在72℃延伸10MIN.SLOPE为0.2.