玉米螟谷胱甘肽转硫酶的纯化及性质研究

• 作者: 周先碗 张庭芳 马素永
• 来源期刊: 北京大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 谷胱甘肽转硫酶(GST) 玉米螟 还原型谷胱甘肽(GSH) 2,4-二硝基氯苯(CDNB) 动力学
• 年，卷（期）: 1999,（4）
• 页码范围: 474-479
• 页数: 6页
• 分类号: Q55
• 字数: 2136字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0479-8023.1999.04.008

摘要

以亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis)为材料,经Sephdex-G75、DEAE-Sepharose Fast Flow、还原型谷胱甘肽(GSH)为配基的亲和层析,分离纯化得到玉米螟谷胱甘肽转硫酶(GST).以2,4-二硝基氯苯(CDNB)为底物测得其比活为1 070 U/mg蛋白,收率为22.9%,提纯1 138倍.经SDS-PAGE和PAGE鉴定,得到的GST为一条带,亚基的分子量为25 kD,经凝胶过滤测得其全酶分子量为50 kD,说明该酶是由两个相同亚基组成的.IEF测得主带等电点为8.2.该酶最适温度为41℃,最适pH范围为6.3～6.9.经动力学测定该酶双底物反应机制为序列机制,对CDNB的Km值为0.15 mmol/L,对GSH的Km值为0.35 mmol/L,两种底物的kcat均为783 s-1.Cl-对底物CDNB有竞争性抑制作用,对GSH是非竞争性抑制作用;3,5-二硝基苯甲酸(DNB)对CDNB有竞争性抑制作用,对GSH是反竞争性抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张庭芳	北京大学生命科学学院	4	32	3.0	4.0
2	周先碗	北京大学生命科学学院	11	216	8.0	11.0
3	马素永	北京大学生命科学学院	1	15	1.0	1.0