经皮注射重组人转化生长因子β_1促进骨折愈合的实验研究

• 来源期刊: 中华骨科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 转化生长因子β 骨折愈合 重组蛋白质类 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 1999,（12）
• 页码范围: 735-738
• 页数: 4页
• 分类号: R96
• 语种: 中文

摘要

目的运用基因重组的方法,对人转化生长因子β1(TRANSFORMING GROWTH FACTOR－β1)进行基因克隆,并在大肠杆菌中表达.同时观察其促进骨折愈合的作用.方法以 PBV 220作为原核细胞表达载体,将 TGF－ β1CDNA片段定向重组到 PBV 220的多克隆位点上,构建原核细胞表达性质粒PTGF－ β1,并转化至大肠杆菌中进行温度诱导表达.制造兔桡骨骨折模型,经皮注射重组 TGF－ β1,并与单纯挠骨骨折模型做对照.术后行X线和同位素骨显像检查.结果表达产物经SDS－PAGE分析,TGF－β1原核表达体系可高效表达 TGF－ β1,其表达产物占菌体可溶性蛋白的 23％.用大鼠肾成纤维细胞(NRK细胞)进行活性检测,该方法生产的 TGF－ β1具有该蛋白的野生生物学活性.术后 X线检查,实验组骨折愈合较对照组平均超前2周;同位素核素骨显像检查,实验组与对照组差异有显著性意义( P＜ 0 05).结论 TGF－β1原核表达体系的建立,为 TGF－ β1的生产提供了高效的表达工程菌,其表达产物能明显促进骨折愈合.