链霉菌M1033同源重组葡萄糖异构酶缺陷型菌株的构建

• 作者: 廖军 徐冲 朱国萍 杨永辉 牛立文 王玉珍 程阳 谢文 陈承露 陶丽梅
• 来源期刊: 科学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 葡萄糖异构酶 链霉菌 同源重组 基因破坏
• 年，卷（期）: 1999,（20）
• 所属期刊栏目: 简报
• 页码范围: 2214-2219
• 页数: 6页
• 分类号: Q93
• 字数: 3720字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0023-074X.1999.20.020

摘要

为实现有工业生产价值的葡萄糖异构酶双突变体酶GI(G138P-G247D)的稳定高效表达,在建立7号淀粉酶链霉菌M1033原生质体转化条件的基础上,构建了含600 bp不完整GI(G138P-G247D)结构基因片段的插入型同源重组质粒pXW,并通过同源重组模式整合到M1033的染色体上,实现了GI基因的破坏(gene disruption),获得了同源重组葡萄糖异构酶缺陷型菌株.对同源重组片段的分析,突变引入的验证以及缺陷型菌株稳定性的检测证实了以此方法在染色体上引入突变的可行性.