血管内皮细胞生长因子受体Flt-1胞外区基因的克隆及其在中国仓鼠卵巢细胞中的表达

• 作者: 周小明 姚立红 安乃莉 张智清 张立国 曾革非 车团结 陈爱君
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 血管内皮细胞生长因子受体 中国仓鼠卵巢细胞 表达
• 年，卷（期）: 2000,（2）
• 所属期刊栏目: 人与动物病毒
• 页码范围: 127-130
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 2440字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2000.02.007

摘要

从原代培养的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)提取细胞总RNA,采用逆转录PCR(RT-PCR)方法得到VEGF受体Flt-1胞外区前3个IgG样区域cDNA片段(Flt-1n3).将获得的受体基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,得到重组质粒pcDNA3.1/Flt-1n3,通过脂质体转染方法将其转入中国仓鼠卵巢细胞(CHO),用G418筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞克隆.经固相结合实验筛选得到表达与VEGF特异结合的目的蛋白的细胞克隆,细胞测活结果表明,表达产物具有抑制人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的活性.鸡胚测活结果表明,CHO细胞表达的r Flt-1n3能抑制鸡胚绒毛尿囊膜的血管形成.