鼠疫菌PH6抗原单克隆抗体的研制及鉴定

• 来源期刊: 地方病通报
• 学科: 医学
• 关键词: 鼠疫菌 PH6抗原 单克隆抗体(MCAB) 鉴定
• 年，卷（期）: 2000,（3）
• 页码范围: 4-6
• 页数: 3页
• 分类号: R378.61
• 语种: 中文

摘要

:(1)依据 p H6抗原的生化特征及表达条件 ,对不同温度 (37℃和 2 8℃ )及不同酸碱度 (p H6和 p H7)条件下培养细菌的提取物进行了电泳图型对比 ;(2 )依照上述电泳图型 ,并结合该抗原的分子量 ,确定了 p H6抗原的电泳迁移位置 ;(3)采用 KCNS洗脱、(NH4) 2 SO4盐析、制备电泳的方法提取和纯化了鼠疫耶尔森氏菌 (Yersinia pestis) p H6抗原 ,SDS-PAGE分析表明 ,提取物均一 ,表征分子量符合 ,回收率较高 ;(4)使用纯化抗原免疫普通小鼠 5只、BAL B/ c小鼠 3只 ,免疫效果良好 ,利用获得的免疫血清 ,建立了 p H6抗原多克隆抗体的 EL ISA检测技术 ,应用于融合细胞中阳性克隆的筛检及实验动物的免疫效果评价 ,应用结果证实 ,检测敏感、有效 ;(5 )利用细胞融合技术获得杂交瘤 17株 ,对其中的 4株进行了 3次再克隆并经半年反复冷冻、复苏及上清检测 ,证实瘤株分泌抗体稳定 ;(6 )对所获单抗进行了 Western blotting(蛋白印迹试验 )鉴定 ,结果显示抗体特异.