人小肠三叶因子的克隆及酶联免疫吸附检测

• 作者: 口如琴 李令媛 王蔚 茹炳根
• 来源期刊: 北京大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 小肠三叶因子 酶联免疫吸附检测 克隆表达
• 年，卷（期）: 2000,（6）
• 页码范围: 777-782
• 页数: 6页
• 分类号: Q516
• 字数: 2729字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0479-8023.2000.06.007

摘要

人小肠三叶因子的cDNA,克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,经IPTG诱导后,hITF以GST-hITF融合蛋白的形式表达,融合蛋白占细菌总蛋白的15%左右.经过Glutathione-Sepharose 4B亲和柱和Sephacry1 S 100分子筛层析纯化了hITF.SDS-PAGE和氨基酸分析证明得到了hITF纯品.以天然hITF为抗原免疫青紫蓝兔制备了抗血清,用纯化的IgG建立了hITF的酶联免疫吸附检测(ELISA)方法,给出了标准工作曲线.应用于纯化过程中样品峰的确立.