人CASK/LIN-2下游信号分子的初步研究

• 作者: 罗勤 罗向东 齐洁
• 来源期刊: 中华医学遗传学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CASK/LIN-2 分化抑制因子 酵母双杂交
• 年，卷（期）: 2000,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 404-408
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3023字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1003-9406.2000.06.007

摘要

目的 揭示人类新基因CASK/LIN-2的生物学功能,运用酵母双杂交LexA系统寻找与hCASK的鸟苷酸激酶结构域(guanylate kinase domain-like, GK)相互作用的蛋白信号分子.方法 将hCASK的GK DNA片段亚克隆进pLexA融合表达质粒,得到的重组质粒pLexA-GK转化酵母EGY48.经证实该重组质粒无转录活性并能进入胞核,结合LexA操纵基因.将人胎脑文库质粒转化EGY48(pLexA-GK,p8op-lacZ),在Gal/Raf his-trp-ura-leu-和Gal/Raf his-trp-ura-X-gal条件下筛选leu+和lacZ+酵母克隆,提取上述阳性酵母质粒转化大肠杆菌KC8,分离出文库质粒;再将这些文库质粒转化EGY48(pLexA-GK,p8op-lacZ),再次筛选和确证阳性文库质粒.经PCR和酶切电泳分析,最后得到两个靶DNA片段.结果 特异性实验证实这两个DNA片段编码蛋白均能与hCASK的GK特异性结合.DNA序列测定和BLASTn分析结果显示两个DNA片段长度分别为732和683 bp,与人分化抑制因子(inhibitor of differentiation 1,Id1) mRNA的同源性分别为97%(630/645)和98%(656/666),表明两个靶DNA片段均属Id1基因.结论 酵母中hCASK的GK能与Id1特异地相互作用,Id1可能为hCASK新的下游信号分子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗向东	第三军医大学西南医院烧伤研究所细胞信号转导联合实验室	73	433	11.0	14.0
2	罗勤	第三军医大学西南医院烧伤研究所细胞信号转导联合实验室	6	24	3.0	4.0
3	齐洁	第三军医大学西南医院烧伤研究所细胞信号转导联合实验室	8	31	3.0	5.0