苏云金芽孢杆菌无晶体突变株的逐级升温筛选及其转化性能

• 作者: 刘子铎 喻子牛 李林 李阜棣 杨超
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 苏云金芽孢杆菌 Cry-突变株 筛选 转化
• 年，卷（期）: 2000,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 85-90
• 页数: 6页
• 分类号: Q939.11
• 字数: 3231字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2000.01.015

摘要

逐级从42℃到44℃和46℃升温培养、并用0.05%SDS处理苏云金芽孢杆菌YBT-1463,获得了一系列内生质粒被部分或完全消除的无晶体(Cry-)突变株,对4种Cry-突变株的转化性能及导入的外源质粒的稳定性进行了研究.用限量培养基和42℃培养筛选到Cry-突变株后,升温至44℃,从Cry-突变株得到内生质粒被进一步消除的突变株;然后升温至46℃来培养其中突变株BMBl70,并用0.05%的SDS进行处理,最终筛选到1株无质粒突变株BMBl71.用pHT3101、pBMBl736、pBTL-1和pHVl249等4种外源质粒进行的转化及稳定性研究表明,转化频率的大小及导入质粒的稳定性与用作受体菌的Cry-突变株携有的内生质粒数之间呈现一定的相关性,Cry-突变株的转化频率显著高于出发菌株,其中BMBl71的转化频率最高达107转化子/μg DNA,且所导入的外源质粒的稳定性也高于其它Cry-突变株及出发菌株YBT-1463.