合浦珠母贝碱性磷酸酶的分离纯化与性质研究

• 作者: 张荣庆 林静瑜 肖锐 谢莉萍
• 来源期刊: 海洋科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 合浦珠母贝 碱性磷酸酶 酶活性
• 年，卷（期）: 2000,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 37-40
• 页数: 4页
• 分类号: Q5
• 字数: 2613字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-3096.2000.10.014

摘要

以合浦珠母贝(Pinctada fucata)为提取酶的原料,经Tris HCl缓冲液(pH7.5)抽提,正丁醇处理,硫酸铵分级沉淀分离,DEAE 纤维素离子交换树脂柱层析,DEAE A25离子交换分子筛柱层析纯化,得到一定纯度的碱性磷酸酶,比活力达到1444U/mg.酶学性质和动力学性质研究表明,该酶催化对硝基苯磷酸(pNPP)的水解反应,最适pH值为9.72,最适温度为45℃,水解反应的活化能为Ka=21.4kJ/mol,初速度为6.1μmol/L,米氏常数Km值为2.86mmol/L,Vm值为9.09μmol/L.产物类似物HPO2-4,WO3-4对该酶均有明显的抑制作用,表现为竞争性抑制.金属离子对该酶的催化活力有不同的影响,正一价金属离子对该酶活性无影响,Mg2+,Co2+,Mn2+对该酶有激活作用,Zn2+对该酶有明显的抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林静瑜	厦门大学生物学系	1	52	1.0	1.0