人免疫缺陷病毒1型Rev单链抗体细胞内免疫抗病毒基因治疗研究

• 作者: 朱明华 段凌浔
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 单链抗体 细胞内免疫 人免疫缺陷病毒-1 T-淋巴细胞 基因治疗
• 年，卷（期）: 2000,（1）
• 所属期刊栏目: 人与动物病毒
• 页码范围: 17-23
• 页数: 7页
• 分类号: R373|R978
• 字数: 4091字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2000.01.004

摘要

应用抗HIV-1 Rev单链抗体细胞内免疫方法,研究在人T细胞和周围血淋巴单核细胞内抗病毒复制的效果,探讨细胞内免疫抗HIV-1基因治疗的可行性.克隆抗HIV-1Rev单链抗体(sFv)基因,以逆转录病毒为基因载体,将包装后的含靶基因的逆转录病毒转导至人CD4阳性T-细胞株CEM和SupT1,以及HIV-1阴性自愿者的周围血淋巴单核细胞(PBMC),再分别用不同剂量(MOI)的HIV-1病毒株PNL4-3和HxB2进行病毒攻击实验.测定HIV-1 p24抗原.滴度以了解抗病毒复制的效果,检测带报道基因CAT以了解靶基因在细胞内的表达状况.分别应用0.24、0.06和0.024MOI的PNL4-3或HxB2病毒株攻击,测定p24抗原.结果显示,抗Rev sFv细胞内表达能有效地抑制病毒在细胞内的复制,与对照组比较,病毒复制被抑制效率达90%以上.体外培养细胞2个月,仍可观察到效果,病毒攻击后合胞体细胞形成显著减少.CAT实验表明,逆转录病毒载体可使靶基因在人T细胞和PBMC内有效表达.抗HIV-1 Rev sFv细胞内表达可有效地抑制病毒复制,有望成为抗HIV-1基因治疗的一种手段.