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摘要:
用PCR方法将编码人微小纤溶酶原(microplasminogen,mPlg)活性中心Ser的密码子置换为Ala密码子,突变体cDNA与分泌型酵母表达载体pHIL-D8重组,构成受醇氧化酶基因(AOX1)的启动子与转录终止区控制的酵母表达质粒,转化GS115酵母菌,经表型筛选、PCR扩增筛选阳性克隆,以甲醇诱导表达,MmPlg分泌至培养液,经Western blot证实. 培养液经离心,上清与重组葡激酶(Staphylokinase,Sak)孵育后,以酪蛋白-琼脂糖平板溶圈法、发色底物法检测,MmPlg未显示纤溶活性.此研究为制备Sak.mPlg复合物的晶体提供了条件.
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文献信息
篇名 人微小纤溶酶原活性中心丝氨酸突变体基因在毕赤酵母中的表达
来源期刊 药物生物技术 学科 生物学
关键词 微小纤溶酶原 突变体 酵母表达
年,卷(期) 2000,(4) 所属期刊栏目 论文
研究方向 页码范围 193-196
页数 4页 分类号 Q556|Q786
字数 2344字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1005-8915.2000.04.001
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 宋后燕 上海医科大学基础医学院分子遗传研究室 15 43 5.0 6.0
2 宋钢 上海医科大学基础医学院分子遗传研究室 4 15 2.0 3.0
3 莫炜 上海医科大学基础医学院分子遗传研究室 3 8 1.0 2.0
4 官孝群 上海医科大学基础医学院分子遗传研究室 1 1 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
微小纤溶酶原
突变体
酵母表达
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
药物生物技术
双月刊
1005-8915
32-1488/R
16开
南京童家巷24号
28-243
1994
chi
出版文献量(篇)
2585
总下载数(次)
20
总被引数(次)
16135
论文1v1指导