猪囊虫病基因工程疫苗的生产工艺研究

• 作者: 刘玉 周宗安 唐雨德 罗涵禄 翟春生 郁兴明 陶开华 顾志香
• 来源期刊: 中国兽医科技
• 学科: 农学
• 关键词: 猪囊虫病 基因工程疫苗 生产工艺
• 年，卷（期）: 2000,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 8-11
• 页数: 4页
• 分类号: S852.734
• 字数: 4834字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2000.10.003

摘要

从重组抗原的表达、复性与纯化、疫苗的配制及疫苗的质量控制等4个方面对猪囊虫病基因工程疫苗的生产工艺进行了探索.确定重组抗原表达的最佳培养液为LB磷酸盐培养液,诱导剂为10g/L乳糖,并根据接种量、溶解氧、罐压、发酵时间等对发酵结果的影响,确定了发酵培养的最佳条件.在重组抗原的复性与纯化方面,工程菌的裂解条件为先用溶菌酶感作再用超声波破菌,超声强度为240W 5次;包涵体的纯化先采用低浓度的尿素洗涤2次,再以5 g/L Triton X-100洗涤1遍,包涵体纯度可达50%以上;重组抗原的复性以静置缓慢透析或分步稀释法为佳,复性液为含2 mol/L尿素、160μmol/L PEG 4000、1.0 mmol/L GSH、0.1 mmol/L GSSG的pH 9.0 50 mmol/L Tris-HCl、1 mmol/L EDTA缓冲液;重组抗原的纯化采用分子筛凝胶层析和离子交换凝胶层析的色谱组合,重组抗原的纯度达90%以上.此外对该疫苗进行了中试生产,共生产7批,产品全部合格,表明该生产工艺稳定,可批量化生产.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶开华		52	342	12.0	15.0
2	郁兴明		39	162	8.0	10.0
3	周宗安		42	223	10.0	13.0
4	刘玉		22	111	7.0	9.0
5	唐雨德		53	306	10.0	14.0
6	顾志香		6	58	5.0	6.0
7	罗涵禄	江苏省农业科学院畜牧兽医研究所	1	13	1.0	1.0