肾癌相关基因克隆--肾癌cDNA消减文库的构建

• 作者: 张强 张志文 毛泽彬 辛殿旗 郭应禄
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 医学
• 关键词: 肾肿瘤 癌 抑制性消减杂交 文库
• 年，卷（期）: 2000,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 301-304
• 页数: 4页
• 分类号: R394.3|R737.11
• 字数: 3673字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2000.03.020

摘要

应用抑制性消减杂交技术,构建人肾癌与正常肾差异表达的cDNA消减文库.分别从肾癌及正常肾细胞系中提取poly(A)+RNA,依次合成单链及双链cDNA,经酶切成平均大小为400～600 bp的片段,将肾癌cDNA分为两组,分别与两种不同的接头衔接,再与正常肾cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR后,将产物与T/A载体连接构建成功cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增.构建成功具有高消减效率的人肾癌cDNA消减文库,非特异性cDNA片段被有效地消减,特异表达的cDNA得到富集.文库扩增后得到6500个克隆,随机挑取350个制备质粒,酶切分析均得到400～600 bp插入片段.所构建的人肾癌cDNA消减文库为进一步大批量筛选、克隆肾癌特异性表达的未知新基因奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张强	北京医科大学第一临床医院泌尿外科研究所	17	205	10.0	14.0
2	郭应禄	北京医科大学第一临床医院泌尿外科研究所	20	364	6.0	19.0
3	张志文	北京医科大学生理系	9	53	5.0	7.0
4	辛殿旗	北京医科大学第一临床医院泌尿外科研究所	4	23	2.0	4.0
5	毛泽彬	北京医科大学生物化学与分子生物学系	1	12	1.0	1.0