GHRP-scu-PA-32K突变体的构建、表达及纯化产物的部分性质研究

• 作者: 徐长法 焦建伟
• 来源期刊: 北京大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 单链尿激酶型纤溶酶原激活剂 GHRP四肽 CHO细胞 定点突变
• 年，卷（期）: 2000,（2）
• 页码范围: 203-208
• 页数: 6页
• 分类号: Q71
• 字数: 1225字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0479-8023.2000.02.010

摘要

在scu-PA-32K的cDNA分子基础上经定点突变,在N端紧接Leu1之前引入编码GHRP四肽的寡核苷酸序列(GGTCATAGGCCT),构建了GHRP-scu-PA-32K的突变体cDNA.将它克隆到表达载体pCM-βneo中,与pCMβ-dhfr共转染CHO/DHFR-细胞.筛选到的稳定表达株在无血清培养基的表达量为580IU/(106细胞.24h).经锌离子螯合亲和柱纯化的产物,SDS-PAGE显示为单一蛋白条带,分子量为33kD,质谱法测定分子量也为33kD.经血纤维蛋白平板法测定比活为150000IU/mg蛋白.对血纤维蛋白的亲和性,突变体为scu-PA-32K的4.5倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	焦建伟	北京大学蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室	7	62	3.0	7.0
2	徐长法	北京大学蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室	7	88	2.0	7.0