K88菌毛蛋白亚基基因克隆、表达及重组蛋白抗血清制备

• 作者: 周智爱 张大兵 梁婉琪 潘爱虎 赵主江 陈建秀 黄亚红 黄诚
• 来源期刊: 上海农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: ETEC K88菌毛蛋白 表达 K88菌毛蛋白抗血清
• 年，卷（期）: 2000,（2）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 38-41
• 页数: 4页
• 分类号: Q785|S854.5+7|S855.1+2|S858.28
• 字数: 2337字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-3924.2000.02.010

摘要

利用PCR技术,从仔猪黄痢的致病菌中扩增出不含信号肽序列的K88菌毛蛋白亚基基因片段,将其克隆到E.coli表达载体pET28a(+)中,构建了该基因的原核表达载体p8828,导入E.coli BL21(DE3),得到工程菌株.SDS-PAGE分析结果显示,经IPTG诱导,该亚基基因高效表达出重组K88菌毛蛋白,约占菌体总蛋白的30%.用含重组蛋白的凝胶作为抗原,免疫新西兰大白兔,首次制备K88菌毛蛋白亚基的抗血清.免疫学分析表明,用此重组蛋白制备的抗血清能与标准的仔猪黄痢野生强毒株发生明显的抗原抗体反应.