鱼生长激素基因在大肠杆菌中表达水平的研究

• 作者: 张红军 李新辉 林文辉 白俊杰 简清 罗建仁 马进
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 鱼生长激素 基因改造 表达水平 大肠杆菌 RNA二级结构
• 年，卷（期）: 2000,（1）
• 页码范围: 31-34
• 页数: 4页
• 分类号: Q786|Q959.4
• 字数: 2715字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1005-8737.2000.01.007

摘要

采用聚合酶链反应(PCR)技术对鲤和鲑生长激素cDNA的5'端和3'端进行定向改造.将改造后的5种基因分别克隆到大肠杆菌表达质粒pBV220 进行原核表达,以研究鱼生长激素基因在大肠杆菌中的表达水平.实验结果表明:(1) 核糖核蛋白体结合位点(SD)与起始密码子AUG 之间的距离对鱼生长激素的表达水平有影响;(2)鲑生长激素基因的终止密码子UAG可能不会有效终止该基因在大肠杆菌中翻译的进行而造成部分通读,加入大肠杆菌强终止码UAA 可避免通读和产生超长蛋白;(3)对鲤和鲑生长激素cDNA的5'端和3'端进行相同的修饰,但两者生长激素的表达量却有很大差异,说明基因的密码子偏性对表达水平有影响;(4)提高5'端RNA二级结构自由能和密码子的适配指数有利于外源基因的高效表达.