人骨形态发生蛋白-2完整成熟肽基因的克隆

• 作者: 余磊 刘大庸 熊绍虎 王朝阳 蒋立新
• 来源期刊: 中国临床解剖学杂志
• 关键词: 骨形态发生蛋白-2 基因 克隆
• 年，卷（期）: 2000,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 252-253
• 页数: 2页
• 分类号: R6
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-165X.2000.03.025

摘要

目的:克隆人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2)完整成熟肽基因.方法:依据Genbank中hBMP-2的序列化学合成两条引物,从人胎儿骨组织中提取得到的总RNA中,通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)得到hBMP-2完整成熟肽基因.将所得的基因片段插入克隆载体pUC-19并转化大肠杆菌JM109,提取重组质粒,酶切鉴定并测序.结果:DNA琼脂糖凝胶电泳显示:PCR产物为一长约400 bp的带,阳性克隆质粒经双酶切可切出约400bp的片段.全自动DNA测序表明与Genbank中的序列完全相符.结论:通过反转录聚合酶链式反应从人胎儿骨组织中成功地克隆了人BMP-2完整成熟肽基因,基因序列完全正确.