山羊皮肤组织细胞分离与培养的研究

• 作者: 寇全安 张涌 李裕强 郭继彤
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 皮肤组织 细胞分离 体外培养 山羊
• 年，卷（期）: 2000,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 133-137,附页
• 页数: 6页
• 分类号: S8
• 字数: 5172字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2000.02.008

摘要

本实验研究了山羊皮肤组织细胞的分离、培养、纯化方法和生长特征,获得了传代培养的山羊皮肤上皮样细胞与成纤维样细胞.组织块贴附培养和分散单细胞接种培养均能获得原代山羊皮肤细胞.用150 IU/mL胶原酶I TCM199液(10 % NCS)37℃下培养消化10 h,可较好地分解组织块,产生接种浓度的分散单细胞.消化培养结束后吸管吹打组织块解离的细胞及每隔3～3.5 h重复3次吹打收集的细胞的生存力明显高于消化后直接从组织块游离出的细胞.山羊皮肤细胞在体外培养时贴壁生长,其原代或早期传代培养物由上皮样细胞与成纤维样细胞组成.混合生长的细胞用0.25 %胰蛋白酶液37℃下消化处理6～8 min,脱壁悬浮者主要为成纤维样细胞,再加酶消化5 min所回收的细胞绝大多数为上皮样细胞.据此可在传代过程中将二者逐步分离纯化.和PBS相比较,用Hanks'液溶解胰蛋白酶作为消化液所回收的细胞传代后有更多的存活.在消化传代时分步收集解离细胞、及时中和酶活性,可降低胰蛋白酶对细胞的损伤作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张涌	西北农业大学动物科学与动物医学学院	12	275	9.0	12.0
2	李裕强	西北农业大学动物科学与动物医学学院	5	139	5.0	5.0
3	郭继彤	西北农业大学动物科学与动物医学学院	3	59	3.0	3.0
4	寇全安	西北农业大学动物科学与动物医学学院	3	59	3.0	3.0