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摘要:
用RT-PCR技术从人肝总RNA中分离扩增了人谷胱甘肽硫转移酶A1基因的cDNA序列,克隆至大肠杆菌表达质粒pET23b,采用蛋白表达筛查法及DNA测序证明该cDNA序列完全正确.重组质粒pET23bhgst转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导获得高效表达的可溶性hGSTA1产物,其表达量约为大肠杆菌可溶性总蛋白的40%.将hGSTA1cDNA亚克隆至乳酸乳球菌表达载体pMG36e,电穿孔法转化乳酸乳球菌MG1363获得hGSTA1乳酸乳球菌表达株.SDS-PAGE及Western杂交分析表明该菌株表达预期大小的hGSTA1融合蛋白,经谷胱甘肽-琼脂糖亲和层析纯化获得的hGSTA1蛋白具有较高的谷胱甘肽硫转移酶活性.具hGSTA1酶活性的乳酸乳球菌工程菌可望应用于研制防癌保健乳制品.
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文献信息
篇名 人谷胱甘肽硫转移酶A1在乳酸乳球菌中的表达及活性研究
来源期刊 微生物学报 学科 生物学
关键词 谷胱甘肽硫转移酶 基因克隆表达 乳酸乳球菌
年,卷(期) 2000,(2) 所属期刊栏目 研究报告
研究方向 页码范围 132-138
页数 7页 分类号 Q555
字数 3728字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:0001-6209.2000.02.004
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 谭华荣 中国科学院微生物研究所 29 240 9.0 14.0
2 向华 中国科学院微生物研究所 17 398 9.0 17.0
3 张亦清 中国科学院微生物研究所 1 27 1.0 1.0
4 卫文仲 中国科学院微生物研究所 3 77 3.0 3.0
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研究主题发展历程
节点文献
谷胱甘肽硫转移酶
基因克隆表达
乳酸乳球菌
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
微生物学报
月刊
0001-6209
11-1995/Q
大16开
北京朝阳区北辰西路1号中科院微生物所内
2-504
1953
chi
出版文献量(篇)
4459
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