一个耐热碱性磷酸酯酶突变型的研究

• 作者: 周宗祥 季朝能 毛裕民 盛小禹 袁有忠 赵思汇
• 来源期刊: 遗传学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 耐热碱性磷酸酯酶 随机诱变 氨基酸置换
• 年，卷（期）: 2000,（4）
• 页码范围: 361-368
• 页数: 8页
• 分类号: Q319
• 字数: 5036字
• 语种: 中文

摘要

为了进一步揭示蛋白质的耐热机制,对含有耐热碱性磷酸酯酶(FD-TAP)的表达质粒pTAP503F进行了随机诱变,用菌落原位显色法从约5000个转化子中筛选到4个耐热性下降的突变型克隆,并对其中1个克隆(TAPM3)进行了部分酶学性质、DNA和氨基酸序列的研究.酶学性质研究表明,与野生型相比,该突变型酶的耐热性有较大幅度的下降,而热激活性无明显改变.DNA序列分析表明在1 239位TAPM3发生GA转换,导致427位的甘氨酸变为丝氨酸(G427S),这种突变对酶的耐热性、米氏常数、活化能影响较为明显.这说明只须1个氨基酸置换就会对蛋白质耐热性变化起巨大作用,并且氨基酸残基侧链的大小、电荷等能使蛋白质结构松散的性质,会导致蛋白质耐热性下降.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周宗祥	复旦大学遗传学研究所遗传工程国家重点实验室	5	31	4.0	5.0
2	季朝能	复旦大学遗传学研究所遗传工程国家重点实验室	29	126	6.0	9.0
3	盛小禹	复旦大学遗传学研究所遗传工程国家重点实验室	10	123	5.0	10.0
4	毛裕民	复旦大学遗传学研究所遗传工程国家重点实验室	50	683	16.0	25.0
5	袁有忠	复旦大学遗传学研究所遗传工程国家重点实验室	1	4	1.0	1.0
6	赵思汇	复旦大学遗传学研究所遗传工程国家重点实验室	1	4	1.0	1.0