鸡痘病毒载体复制非必需片段优化及强启动子的筛选

• 作者: 刘秀梵 吴艳涛 张如宽 彭大新 朱爱华 高崧
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡痘病毒 复制非必需片段 启动子 β-半乳糖苷酶 活性
• 年，卷（期）: 2000,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 129-132,附页
• 页数: 5页
• 分类号: S8
• 字数: 4017字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2000.02.007

摘要

以痘苗病毒启动子P7.5调控的β-半乳糖苷酶(LacZ)基因为检测基因,分别插入三个复制非必需片段构成重组质粒,脂质体介导转染鸡痘病毒中国疫苗株282E4感染原代鸡胚成纤维细胞(CEF)单层,蓝斑筛选纯化病毒;将重组病毒感染次代CEF,收获细胞后制备提取物,检测其中的β-半乳糖苷酶的活性,由此得到一个基因表达效率高的复制非必需片段pFPV7s.根据痘苗病毒天然启动子P7.5的结构,人工合成4条寡核苷酸,形成一个早期和一个晚期启动子,将合成的启动子进行不同组合,最终形成10个较有代表性的启动子组合;以P7.5为对照,在其下游分别插入大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因LacZ,并进一步插入pFPV7s构建成鸡痘病毒转移载体,以同样的方法检测β-半乳糖苷酶的活性,得到了表达活性约为p7.5的 3.5倍的LLEE启动子组合.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴艳涛	扬州大学畜禽传染病农业部重点开放实验室	105	1064	18.0	27.0
2	高崧	扬州大学畜禽传染病农业部重点开放实验室	134	1223	19.0	27.0
3	刘秀梵	扬州大学畜禽传染病农业部重点开放实验室	373	3732	28.0	39.0
4	彭大新	扬州大学畜禽传染病农业部重点开放实验室	133	1222	21.0	28.0
5	张如宽	扬州大学畜禽传染病农业部重点开放实验室	72	1152	20.0	29.0
6	朱爱华	扬州大学畜禽传染病农业部重点开放实验室	8	91	5.0	8.0