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摘要:
介绍了一个简便的DNA改组操作程序.首先利用PCR扩增了两段具有高度序列同源性的1 700 bp左右的基因片段,两者相比较同源性大于93%.然后将其等量混合后,在Mg2+存在的条件下,用DNaseⅠ切割成10~50 bp的小片段.这些小片段在不外加引物的前提下,利用PCR反应进行重聚,再将重聚物经过两轮正常的PCR扩增,获得了与原来片段大小相当的基因片段.这一技术有利于从一组序列同源性程度较高的基因库构建随机嵌合基因.
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文献信息
篇名 一个简便的DNA改组(DNA shuffling)操作程序
来源期刊 生物化学与生物物理进展 学科 生物学
关键词 DNA改组 重聚 PCR 定向进化
年,卷(期) 2000,(6) 所属期刊栏目 技术与方法
研究方向 页码范围 655-657
页数 3页 分类号 Q58
字数 2315字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:1000-3282.2000.06.021
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 周佳海 中国科学院上海有机化学研究所生命有机化学国家重点实验室 6 18 2.0 4.0
2 陈海宝 中国科学院上海有机化学研究所生命有机化学国家重点实验室 6 47 4.0 6.0
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DNA改组
重聚 PCR
定向进化
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生物化学与生物物理进展
月刊
1000-3282
11-2161/Q
大16开
北京朝阳区大屯路15号中国科学院生物物理研究所内
2-816
1974
chi
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