肿瘤抗原p185蛋白的纯化及其鉴定

• 作者: 何球藻 李晓华 秦慧莲
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HER2/neu蛋白 蛋白纯化 亲和层析法 肿瘤抗原
• 年，卷（期）: 2000,（7）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 381-383
• 页数: 3页
• 分类号: R73
• 字数: 2263字
• 语种: 中文

摘要

目的:从转染HER2/neu基因的3T3/neu细胞中纯化p185蛋白,研究其免疫原性和作为肿瘤疫苗的可能性.方法:采用溴化氰活化的Sepharose 4B为基质,通过交联520C9单克隆抗体(杂交瘤腹水中沉淀的γ-球蛋白),用亲和层析的技术纯化p185蛋白.经梯度盐溶液解离与抗体结合的p185蛋白,收集到蛋白洗脱峰,用ELISA检测p185的免疫反应性,并经SDS-PAGE和Western Blot进一步鉴定.结果:经过亲和层析所收集的蛋白吸收峰与p185活性峰重合,SDS-PAGE和Western Blot进一步证实纯化蛋白的分子量约为185 kD,是HER2/neu编码的肿瘤抗原.从肿瘤细胞中纯化p185肿瘤抗原的收获率约为1.129×10-5 mg/mg蛋白浓度的细胞裂解上清.结论:从转基因细胞中成功获取p185肿瘤抗原,将用于后续研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何球藻	上海医科大学免疫学教研室	9	33	4.0	5.0
2	秦慧莲	上海医科大学免疫学教研室	10	104	4.0	10.0
3	李晓华	上海医科大学免疫学教研室	4	2	1.0	1.0