冰冻组织特定区域的RNA快速提取及其RT-PCR分析

• 作者: 刘佳 刘宁 李宏 江岩
• 来源期刊: 中华医学遗传学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 冰冻切片 特定组织 RNA快速提取 逆转录多聚酶链反应
• 年，卷（期）: 2000,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 47-50
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2798字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1003-9406.2000.01.013

摘要

目的:为减少RNA提取过程中不同细胞和组织间的交叉污染,提高逆转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)结果的特异性和可靠性.方法:建立冰冻组织特定区域的RNA快速提取及RT-PCR检测技术.首先,制备5μm和20μm的连续冰冻切片,前者用于常规组织学染色和针对靶基因产物的免疫组织化学染色.依观察结果,在20μm的切片上,分离某一特定区域做快速RNA提取和RT-PCR分析.结果:该方法能在1小时内完成微量组织的RNA提取,并在6小时内获得RT-PCR结果.与常规RNA提取法比较,可有效排除因细胞间污染所致的假阴性或假阳性结果.结论:该方法适用于在多种类型组织混杂的标本内检测某一特定细胞群体和各群体间的基因表达以及表达差异,是对现有RNA提取和RT-PCR检测技术的重要补充.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘佳	沈阳医学院分子生物学研究室	9	33	3.0	5.0
2	江岩	沈阳医学院分子生物学研究室	13	28	4.0	5.0
3	李宏	沈阳医学院分子生物学研究室	11	33	3.0	5.0
4	刘宁	沈阳医学院分子生物学研究室	10	82	5.0	9.0