原核表达的多串重复人脑钠素蛋白的裂解

• 作者: 任运生 刘颖 李恩民 温博贵 黄革
• 来源期刊: 汕头大学医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人脑钠素 包涵体 蛋白纯化 制备性电泳
• 年，卷（期）: 2000,（1）
• 所属期刊栏目: 全英论著
• 页码范围: 1-3,9
• 页数: 4页
• 分类号: R74
• 字数: 575字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4716.2000.01.001

摘要

目的:将原核表达的多串重复人脑钠素蛋白裂解成单体.方法:利用高效表达质粒载体将串联5拷贝人脑钠素基因转入宿主菌E.coli M5219,以热诱导方式表达 5BNP融合蛋白,超声裂解收获 5BNP融合蛋白包涵体,制备性电泳分离纯化;凝血酶消化后,再经BMPS-Skatole 法裂解.结果:利用本文原核表达系统所表达的5BNP融合蛋白占菌体总蛋白的30%,采用制备性电泳可获得纯度＞95%的5BNP融合蛋白;凝血酶消化后,再经BNPS-Skatole法可以将5BNP融合蛋白裂解成BNP单体.结论:BMPS-Skatole法是裂解多串重复人脑钠素蛋白的良好方法.