一种快速高效分离和纯化重组腺病毒伴随病毒载体的方法

• 作者: 伍志坚 侯云德 吴小兵 屈建国 董小岩
• 来源期刊: 科学通报
• 学科: 医学
• 关键词: 重组腺病毒伴随病毒 氯仿 纯化
• 年，卷（期）: 2000,（19）
• 所属期刊栏目: 简报
• 页码范围: 2071-2075
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3714字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0023-074X.2000.19.009

摘要

利用2型腺病毒伴随病毒(adeno-associated virus type 2, AAV-2)能够抵抗氯仿的特性, 采用"氯仿处理-PEG/NaCl沉淀-氯仿抽提" 3个步骤分离、浓缩和纯化重组腺病毒伴随病毒(recombinant adeno-associated virus, rAAV), 整个纯化过程可在4 h内完成. 最终从5个转瓶生长的4×109个载体生产细胞中可得到5×1013 病毒颗粒/mL, SDS-聚丙烯酰胺凝胶结果表明, rAAV的纯度大于95%, 电子显微镜下绝大多数病毒颗粒的结构完整. 纯化后的rAAV仍保持较强的感染性, 其感染性滴度达到2×1012 转导单位(transducing unit, TU)/mL, 总的病毒颗粒数与感染性病毒颗粒数的比值为25. 为rAAV 大规模生产后的纯化提供了一种简便、快速、低成本的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴小兵	中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室	25	373	7.0	19.0
2	伍志坚	中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室	8	320	5.0	8.0
3	董小岩	中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室	4	219	3.0	4.0
4	侯云德	中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室	25	474	11.0	21.0
5	屈建国	中国预防医学科学院病毒学研究所形态室	11	298	6.0	11.0