α-catenin/GST融合蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备

• 作者: 张志谦 林仲翔 林本耀 王冰晶 马忠良
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 医学
• 关键词: α-catenin 融合蛋白 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2001,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 370-374
• 页数: 5页
• 分类号: Q249|R37-73
• 字数: 3773字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3321/j.issn:0529-1356.2001.04.021

摘要

目的制备α-catenin多克隆抗体,为深入研究其功能和探讨其与肿瘤等疾病的相关性提供工具.方法 PCR扩增编码人α-catenin C-端455个氨基酸的DNA片段 ,D NA重组入原核表达质粒pGEX-4T-3,转化大肠杆菌JM109菌株,异丙基β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导产生GST/α-catenin融合蛋白.GST-Sepharose亲和层析纯化可溶性融合蛋白,免疫新西兰白兔,制备抗血清.通过ELISA、免疫荧光细胞化学和SP免疫组织化学法鉴定血清特异性和效价. 结果成功地构建了pGEX-4T-3/α-Cat表达载体,转化JM109后可高效表达融合蛋白GST-α-catenin(α-Cat).免疫兔产生的α-Cat多抗可特异检测人体组织和细胞中α-Cat表达及定位情况. 结论α-catenin抗体效价高,特异性强,适合免疫组织化学、ELISA等检测应用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马忠良	北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所细胞生物室	4	11	2.0	3.0
3	王冰晶	北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所细胞生物室	4	7	2.0	2.0
4	张志谦	北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所细胞生物室	17	80	5.0	8.0
7	林仲翔	北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所细胞生物室	5	13	3.0	3.0
8	林本耀	北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所细胞生物室	15	97	7.0	9.0