转IL-2基因的骨髓基质细胞对骨髓移植后免疫功能重建的促进作用

• 作者: 蒋激扬 谢蜀生 郝洁
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓基质细胞系 免疫重建 IL-2 基因治疗
• 年，卷（期）: 2001,（12）
• 所属期刊栏目: 肿瘤免疫学
• 页码范围: 653-656,663
• 页数: 5页
• 分类号: R392.4
• 字数: 3416字
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨了用逆转录病毒载体转入小鼠IL-2基因的基质细胞系QXMSC1对异基因骨髓移植后免疫功能重建的促进作用.方法:将小鼠IL-2cDNA片段连接到逆转录病毒载体PLXSN 上,构建重组逆转录病毒载体PL2SN(含小鼠IL-2cDNA).用磷酸钙共沉淀法将PL2SN转入单嗜性包装细胞系CRE,获得G418抵抗细胞株后,以上清感染双嗜性包装细胞系CRIP,G418筛选后获得高滴度的包装细胞系CRIPIL-2.感染NIH3T3细胞测定CRIPIL-2培养上清病毒滴度为 3. 4×105 cfu/ml.感染骨髓基质细胞系QXMSC1(H-2d),G418筛选,有限稀释法得10个单克隆细胞株,选择表达IL-2最高的细胞株为实验用细胞QXMSC1IL-2,用于以后的实验.供体小鼠 BAL B/c(H-2d)骨髓以抗T细胞单抗anti-Thy1.2加补体去除骨髓中T细胞,受体小鼠C57BL/6 (H-2b )经γ射线致死剂量照射后,输入供体骨髓1×107/只,同时输入基质细胞QXMSC1IL-2 5 ×105 /只.在第30天、60天检测BMT小鼠脾细胞对LPS、ConA的反应,脾细胞产生IL-2的能力,BM T小鼠产生抗体生成细胞(PFC)的能力及产生DTH的能力.流式细胞仪检测了QXMSC1IL-2对BM T 小鼠T细胞亚群的影响.结果:电泳及酶切鉴定证实构建的PL2SN质粒.QXMSC1IL-2细胞系I L-2的分泌量为857 U(1×106*24h).异基因骨髓移植,共输入QXMSC1IL-2能明显增加B MT小鼠脾细胞对LPS、ConA的反应.脾细胞产生IL-2的能力增强.PFC数目增加,DTH反应增强.T 细胞亚群中CD4+/CD8+的比例有所恢复.结论: 转入IL-2的骨髓基质细胞系可促进骨髓移植后免疫功能重建.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郝洁	北京大学医学部免疫系	22	58	5.0	6.0
2	谢蜀生	北京大学医学部免疫系	81	341	9.0	15.0
3	蒋激扬	北京大学医学部免疫系	8	59	4.0	7.0