一种早胚发育促进因子"DPF-1”cDNA的表达、纯化及其抗体的制备

• 作者: 左嘉客 潘勇 王俊茹 顾正
• 来源期刊: 生殖与避孕
• 学科: 医学
• 关键词: DPF-1 pGEX-4T-3 亲和层析,抗体
• 年，卷（期）: 2001,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 143-148
• 页数: 6页
• 分类号: Q78|R392
• 字数: 3829字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-357X.2001.03.003

摘要

目的:表达纯化GST-DPF-1融合蛋白,制备抗DPF-1抗体,用抗DPF-1抗体进行功能封闭实验.方法:用EcoRI和NotI双酶切pBluescriptIIKS/1.9kb DPF-1 cDNA,得到1.9kb DPF-1 cDNA;HincII酶切该片段,得到1.8 kb DPF-1 cDNA;SmaI与NotI双酶切GST融合基因表达载体pGEX-4T-3,得到线性pGEX-4T-3载体;1.8kb DPF-1 cDNA与线性pGEX-4T-3载体连接,构建了重组pGEX-4T-3/DPF-1 cDNA.带有重组质粒的DE3菌37℃培养,IPTG诱导,菌体裂解及蛋白纯化.融合蛋白免疫BALB/c小鼠,制备抗血清,抗血清经GST吸附.结果:获得的GST-DPF-1融合蛋白和针对DPF-1的抗体具有较好的专一性.经GST吸附后的抗DPF-1抗血清可使条件培液中的昆明小鼠受精卵全部被阻断于2-细胞期.结论:该抗体可用于天然DPF-1的纯化、DPF-1功能及作用机制的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘勇	计划生育药具国家重点实验室上海市计划生育科学研究所	2	4	1.0	2.0
2	顾正	计划生育药具国家重点实验室上海市计划生育科学研究所	4	9	2.0	3.0
3	王俊茹	计划生育药具国家重点实验室上海市计划生育科学研究所	1	4	1.0	1.0
4	左嘉客	计划生育药具国家重点实验室上海市计划生育科学研究所	3	9	2.0	3.0