草鱼IGF-I cDNA的克隆和在原核生物中的表达

• 作者: 华益民 林浩然
• 来源期刊: 动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 草鱼胰岛素样生长因子-I克隆原核生物的表达
• 年，卷（期）: 2001,（3）
• 所属期刊栏目: 研究沦文
• 页码范围: 274-279
• 页数: 6页
• 分类号: Q959
• 字数: 4894字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5507.2001.03.005

摘要

根据亲缘关系较近的鲤鱼胰岛素样生长因子-I(IGF-I)cDNA设计一对引物,通过RT-PCR从草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝组织首次克隆了草鱼IGF-I cDNA开放阅读框(ORF)片段.经序列分析表明克隆的草鱼IGF-I cDNA为Ea-2亚型,ORF与鲤鱼有95%的同源性,与人有63%的同源性;草鱼IGF-I蛋白与鲤鱼IGF-I仅2个氨基酸残基不同,与人IGF-I也仅有13个残基不同.将表达成熟草鱼IGF-I(gcIGF-I)蛋白的cDNA片段亚克隆至谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合表达载体pGEX-4T-3,再将构建的重组表达载体pGEX-T-gcIGF-I转入大肠杆菌BL21.在IPTG的诱导下,GST-gcIGF-I融合蛋白高效表达.兔抗鲑鱼IGF-I抗血清进行的Western B1ot检测显示重组草鱼IGF-I蛋白具有免疫活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林浩然	中山大学生命科学学院水生经济动物研究所	103	1848	23.0	38.0
2	华益民	中山大学生命科学学院水生经济动物研究所	3	97	3.0	3.0