硒代甲硫氨酸抗烟毒素蛋白衍生物的制备

• 作者: 何红珍 刘一苇 刘斌斌 刘进元 唐洪 曹振波 江凡 赵南明 陈宇航 饶子和
• 来源期刊: 科学通报
• 学科: 工学
• 关键词: 硒代甲硫氨酸抗烟毒素蛋白衍生物晶体表达纯化质谱
• 年，卷（期）: 2001,（8）
• 所属期刊栏目: 简报
• 页码范围: 662-666
• 页数: 4页
• 分类号: TQ93
• 字数: 4192字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0023-074X.2001.08.010

摘要

为利用硒原子的反常散射获取抗烟毒素蛋白晶体X射线衍射的相位信息, 以质粒pQE-30为表达载体, E. coli M15 为宿主菌, 在含有硒代甲硫氨酸的M9培养基中用IPTG诱导表达硒代甲硫氨酸抗烟毒素蛋白衍生物. 通过Ni-NTA金属亲合层析和Mono Q阴离子交换层析纯化目标蛋白. 产物经SDS-PAGE检验纯度达95%以上, 经MALDI-TOF和ESI-Quadrupole质谱检测证实抗烟毒素蛋白硒代甲硫氨酸标记成功. 采用与抗烟毒素蛋白晶体生长类似的条件, 获得了衍生物可供衍射的晶体.