猪生殖和呼吸综合征病毒B13株ORF7基因的克隆及在杆状病毒系统中的表达

• 作者: 刘尚高 李树根 林志雄 罗长宝 赵耘 陈博文 陈茹
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪生殖和呼吸综合征病毒(PRRSV) ORF7基因 测序 杆状病毒表达载体 表达
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 页码范围: 75-80
• 页数: 6页
• 分类号: S852
• 字数: 3971字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2001.01.015

摘要

利用单管RT-PCR方法扩增猪生殖和呼吸综合征病毒（PRRSV）分离株B13株包括ORF7基因的片段，并对其序列进行了测定，结果PRRSV分离株B13ORF7基因长度为384bp，编码128个氨基酸组成的15kD蛋白。与已发表的PRRSVLV株、VR-2332株进行同源性比较，发现核苷酸同源性分别为99.2%、59.4%；氨基酸同源性分别为98.4%、54.7%。表明PRRSV分离株B13在基因结构上可能与LV株同属于欧洲亚群。同时构建了重组转移载体质粒pAcGHLT-B-ORF7，用该重组转移载体质粒与线性化苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒（AcMNPV-SVI－G）基因组DNA（baculogold linearized baculovirusDNA）共转染草地夜蛾（Spodoptcra frugiperda，Sf9）细胞，得到重组病毒AcMNPV-OCC－-GST-6xHis-ORF7。在感染了重组病毒的Sf9细胞中检测到分子量为46kD的ORF7基因的GST融合蛋白表达产物，能被猪抗PRRSVB13株多克隆血清所特异识别。此结果为PRRS新型诊断抗原的研制奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘尚高		33	358	10.0	18.0
2	赵耘		43	551	14.0	21.0
3	陈博文		13	114	3.0	10.0
4	林志雄		8	154	3.0	8.0
5	罗长宝		2	92	2.0	2.0
6	陈茹		6	92	2.0	6.0
7	李树根		2	92	2.0	2.0