凋亡素的克隆及诱导HeLa细胞凋亡

• 作者: 孙国敬 孙志贤 童新
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: 凋亡素 克隆 细胞凋亡 聚合酶链反应 转染
• 年，卷（期）: 2001,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 85-88
• 页数: 4页
• 分类号: Q255
• 字数: 2051字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2001.02.002

摘要

目的:克隆凋亡素(apoptin)的全长基因,在肿瘤细胞HeLa中表达并诱导其凋亡.方法:从CAV病毒基因组TK5803中通过PCR技术扩增凋亡素基因,直接克隆至真核表达载体 pCDNA3.1/His/Topo,序列测定证实其正确性,并克隆至pCIneo真核表达载体构建重组表达载体.采用脂质体转染HeLa细胞,转染3 d后Honchest33258染色并于荧光显微镜下观察细胞状态.结果与讨论:核酸序列分析证实所克隆的凋亡素基因与文献报道的一致,将其成功克隆至真核表达载体pCDNA3.1/His/Topo 和pCIneo,构建了真核重组质粒pCIneo-apoptin和pCDNA3.1/His/Topo-apoptin, 转染HeLa细胞3 d后可见明显的细胞凋亡,而只转染空质粒的对照组则较少.表明凋亡素能够有效地诱导HeLa细胞凋亡.本研究为进一步研究凋亡素诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙志贤	军事医学科学院放射医学研究所	58	358	11.0	15.0
2	孙国敬	军事医学科学院放射医学研究所	11	96	7.0	9.0
3	童新	军事医学科学院放射医学研究所	6	61	4.0	6.0