类鼻疽伯克霍尔德氏菌UDPE检测方法的建立和应用

• 作者: 宋亚军 张敏丽 杨瑞馥 王津 郭兆彪
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 类鼻疽伯克霍尔德氏菌 尿嘧啶糖基化酶(UDG) PCR 微孔板杂交
• 年，卷（期）: 2001,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 35-37
• 页数: 3页
• 分类号: R378.8
• 字数: 3700字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2001.02.010

摘要

目的 建立防止产物污染的UDPE(UDG-Duplex PCR-EIA)技术，用于检测类鼻疽伯克霍尔德氏菌。方法选择类鼻疽伯克霍尔德氏菌FUR(Ferric Uptake Regulator)基因为靶序列，设计两对引物进行PCR扩增，用UDG(尿嘧啶糖基化酶)防止PCR产物污染，并用微孔板杂交-酶联显色检测扩增的PCR产物片段；用不同的模板考察方法的特异性和灵敏度。结果该检测系统可以特异性地检测类鼻疽伯克霍尔德氏菌；对于纯DNA模板，检测灵敏度可以达到10fg/μl；对于系列稀释菌液提取的模板，灵敏度可达0.1个菌/μl；对于模拟污水标本、模拟组织标本和模拟土壤标本的检测灵敏度分别为10个菌/μl，100个菌/μl和100个菌/μl；检测系统可以防止109个PCR产物分子的污染；检测系统可以在37℃下稳定保存7d。结论本研究建立了稳定的，防止产物污染，灵敏度和特异性均较理想的类鼻疽伯克霍尔德氏茵UDPE检测系统。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨瑞馥	军事医学科学院微生物流行病研究所	180	1706	21.0	33.0
2	张敏丽	军事医学科学院微生物流行病研究所	38	388	12.0	18.0
3	郭兆彪	军事医学科学院微生物流行病研究所	47	474	13.0	20.0
4	王津	军事医学科学院微生物流行病研究所	30	378	11.0	18.0
5	宋亚军	军事医学科学院微生物流行病研究所	41	437	13.0	19.0