肌注腺伴随病毒基因治疗血友病B的安全性研究

• 作者: 伍志坚 卢大儒 吴小兵 薛京伦 邱信芳 邹蓓艳 陈立
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: rHSV/AAV包装系统 单纯疱疹病毒(HSV) 野生型腺伴随病毒 基因治疗 安全性 肌注途径
• 年，卷（期）: 2001,（4）
• 所属期刊栏目: 人与动物病毒
• 页码范围: 301-306
• 页数: 6页
• 分类号: R554.1
• 字数: 5318字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2001.04.003

摘要

研究了肌注腺伴随病毒(adeno-associated virus,AAV)介导凝血Ⅸ因子基因治疗血友病B的安全性.首先采用PCR、反转录PCR(RT-PCR)分别检测rHSV/AAV包装系统产生的重组腺伴随病毒AAV-mFⅨ,和病毒感染细胞后所得上清再次感染的BHK细胞中的HSV(herpes simplex virus,HSV)和野生型AAV.同时观察HSV引起的细胞毒作用.结果表明:纯化后的AA-mFⅨ中HSV≤1个病毒基因组(viral genome,v.g.)/108个病毒基因组AAV-mFⅨ,且不具备感染活性;没有野生型AAV.其次,采用PCR、RT-PCR、免疫组化等方法检测了AAV-mFⅨ在体内的分布和表达时间;通过抗AAV的抗体检测和病理切片等方法观察了AAV-mFⅨ在体内引起的免疫反应和病理变化.结果表明:AAV-mFⅨ仅分布在注射点肌肉组织内,表达可持续200天以上;抗体水平低,各主要脏器均未发生明显的病理变化.AAV介导的凝血因子Ⅸ系统是安全的.