TNF受体（P55）胞外区基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 姚立红 安乃莉 张智清 张立国 徐春晓 曾革非 陈爱君
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 生物学
• 关键词: TNF可溶性受体 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2001,（2）
• 页码范围: 127-131
• 页数: 5页
• 分类号: Q781
• 字数: 3662字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2001.02.007

摘要

TNF与多种疾病密切相关。为了获得大量具有生物学活性的可溶性TNF受体用以拮抗TNF的毒性作用，在原核表达系统中表达了TNFR（P55）的胞外区与TrxA的融合蛋白。将TNFR（P55）胞外区去信号肽的前三个结构域基因克隆入融合蛋白表达载体pET-32a，在大肠杆菌BL21（DE3）中高效表达了TrxA-TNFR融合蛋白。表达产物以包涵体形式存在，经过变性和复性，并经镍金属鳌和柱亲和层析纯化，得到了纯度较高的可溶性受体蛋白的初纯品。免疫学实验及L929细胞体外实验均表明：该蛋白具有TNFR（P55）特异的抗原性、与TNF结合的活性以及良好的抑制TNF的生物学活性。