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摘要:
细胞分泌性蛋白的分泌有赖于蛋白质N端的信号肽的存在。利用酵母建立了从cDNA文库中筛选编码信号肽的基因片段的遗传系统。为此,用一步基因破坏法对酿酒酵母EGY48基因组中的suc 2基因(编码酵母蔗糖转换酶)进行了定位突变,获得了无蔗糖转换酶表达的酵母株EGY48-△ suc。将无信号肽的suc 2成熟肽基因克隆于酵母乙醇脱氢酶(ADH1)基因启动子下游,得到用于文库筛选的酵母真核表达载体。启动子与成熟肽基因之间为多克隆位点,用于插入待筛选的cDNA文库。用此载体转化酵母EGY48-△ suc,所得克隆可在以葡萄糖为碳源的培养基上生长,但不能在以棉子糖为碳源的培养基上生长;在suc 2成熟肽基因前分别插入suc 2信号肽基因片段或人IL-2受体α链信号肽基因片段,然后转染EGY48-△ suc,所得克隆既能在以葡萄糖为碳源的培养基上生长,也能在以棉子糖为碳源的培养基上生长。表明构建的系统可用于筛选插入多克隆位点的cDNA片段是否具有编码信号肽的功能。
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文献信息
篇名 信号肽捕获系统的建立
来源期刊 遗传学报 学科 生物学
关键词 蔗糖转换酶 同源重组 信号肽 基因克隆
年,卷(期) 2001,(4) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 379-384
页数 6页 分类号 Q785|Q789
字数 3820字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 韩骅 第四军医大学生化与分子生物学教研室 118 472 11.0 13.0
2 李荣 第四军医大学生化与分子生物学教研室 16 133 5.0 11.0
3 周鹏 第四军医大学生化与分子生物学教研室 17 44 4.0 5.0
4 孙强 第四军医大学生化与分子生物学教研室 28 131 7.0 10.0
5 王冀姝 第四军医大学生化与分子生物学教研室 13 86 5.0 9.0
6 黄红艳 第四军医大学生化与分子生物学教研室 3 24 3.0 3.0
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研究主题发展历程
节点文献
蔗糖转换酶
同源重组
信号肽
基因克隆
研究起点
研究来源
研究分支
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引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
遗传学报
月刊
1673-8527
11-5450/R
北京市朝阳区北辰西路1号院2号,遗传与发育生物学研究所
eng
出版文献量(篇)
2447
总下载数(次)
4
总被引数(次)
78032
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
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