中间脉孢霉谷氨酸脱氢酶基因的克隆及在大肠杆菌和烟草中的表达

• 作者: 王芳 田波
• 来源期刊: 科学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 中间脉孢霉 谷氨酸脱氢酶 基因序列 米氏常数 酶活性 转基因烟草
• 年，卷（期）: 2001,（2）
• 所属期刊栏目: 简报
• 页码范围: 137-140
• 页数: 4页
• 分类号: Q81
• 字数: 3998字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0023-074X.2001.02.012

摘要

用谷氨酸脱氢酶(GDH)提高植物氮肥利用率是国际上生物工程研究的热点之一. 通过RT-PCR方法克隆了真菌中间脉孢霉(Neurospora intermedia, 简称Ni), 好食脉孢霉(N. sitophila), 粗糙脉孢霉(N. crassa)的gdh基因, 进行序列测定. 前两种gdh基因的序列为首次报道. 分别将上述gdh基因克隆入pET30a质粒在大肠杆菌中表达, 纯化后进行酶活性及米氏常数(Km)测定, 结果发现大肠杆菌表达的Ni-GDH具有更高的酶活性, 其Km值在0.3~0.45 mmol/L左右. 选择Ni-GDH基因转化烟草, 发现它能促进烟草在低氮水平下的生长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王芳	中国科学院微生物研究所	202	2968	29.0	47.0
2	田波	中国科学院微生物研究所	70	951	16.0	29.0