用同源重组法修饰含人α类珠蛋白基因簇的细菌人工染色体

• 作者: 冯东晓 刘德培 梁植权 黄粤
• 来源期刊: 遗传
• 学科: 生物学
• 关键词: 细菌人工染色体 同源重组 α-珠蛋白
• 年，卷（期）: 2001,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 187-191
• 页数: 5页
• 分类号: Q812
• 字数: 3404字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-9772.2001.03.001

摘要

采用Rec A蛋白介导的同源重组的方法，对本实验室筛选出的包含完整人α-类珠蛋白基因簇的细菌人工染色体（BAC）DNA进行删除修饰。首先采用PCR的方法，分别在预删除的HS-40增强子区域的上游和下游克隆长度约为500bp的两段同源序列，并一起克隆到构建载体pBV的XbaI和HindIII位点上，SalI酶切后回收1kb左右的片段并克隆到温度敏感的穿梭质粒pSV-RecA中，转化带有人α-类珠蛋白基因簇的BAC DNA的感受态大肠杆菌DH10B，经氯霉素正筛选和镰孢菌酸的负筛选，获得发生两次同源重组后只含BAC DNA而穿梭载体已丢失的菌株，经Southern杂交鉴定，获得了HS-40被定位删除的BAC突变体克隆。表明同源重组的方法可以对含有较多重复序列的BAC DNA进行准确的删除修饰。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘德培	中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院	32	162	7.0	11.0
2	梁植权	中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院	9	51	4.0	7.0
3	黄粤	中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院	3	24	2.0	3.0
4	冯东晓	中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院	1	7	1.0	1.0